【摘要】以东北七鳃鳗心肌总RNA反转录得到的cDNA为模板，PCR扩增PHB2基因全长CDS区，并将其定向克隆至真核表达载体pEGFP-Nl上，构建真核重组载体pEGFP-Nl-Lm-PH B2.提取重组质粒，去除内毒素，利用脂质体介导的方法转染CHL、HeLa和MCF-7细胞，通过Western Blot检测转染后Lm:PHB2是否表达，Confocal观察EGFP融合蛋白在细胞中的表达及亚细胞定位，结果表明：PCR扩增片段与预期结果相符，双酶切和测序证明真核表达载体构建成功；Western Blot栓测到Lm-PHB2蛋白条带，Confocal观察到绿色荧光蛋白GFP，证明真核重组载体成功表达；Lm-PHB2蛋白主要定位在CHL细胞的细胞核，少量存在于基质和线粒体中，而在HeLa和MCF-7细胞中，Lm-PHB2蛋白集中定位在细胞核中，本研究为七鳃鳗Lm-PHB2的功能研究奠定了重要基础
【关键词】
《科技创新与应用》 2015-10-30
《邵阳学院学报（社会科学版）》 2015-10-30
《辽宁师范大学学报（自然科学版）》 2015-10-30
《科技创新与应用》 2015-10-30
《科技创新与应用》 2015-11-02
《科技创新与应用》 2015-10-30
《科技创新与应用》 2015-10-30
《科技创新与应用》 2015-11-02
010-56259535
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